蛋白质含量实验-蛋白质含量测定实验

蛋白质工程 34

今天给大家分享蛋白质含量实验,其中也会对蛋白质含量测定实验的内容是什么进行解释。

文章信息一览:

生物化学实验紫外法测定蛋白质含量中哪些不良操作会对实验结果产生影响...

1、【实验操作】稀释血清(或其他蛋白质溶液),准确吸取0.1mL血清,置于50mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度(即500倍)。测定光密度在紫外分光光度计上,将稀释的蛋白质溶液倒入石英比色杯中,用生理盐水做对照,测得280nm和260nm两个波长的光密度。

2、缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介质溶液等因素的影响和限制。

蛋白质含量实验-蛋白质含量测定实验
(图片来源网络,侵删)

3、色氨酸、酪氨酸的含量不同。紫外吸收法测定蛋白质含量结果偏小的原因是测定的蛋白质与标准蛋白质中色氨酸、酪氨酸的含量不同,会造成一定的误差导致的。

蛋白质含量的测定方法有哪些

双缩脲法。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。

蛋白质含量实验-蛋白质含量测定实验
(图片来源网络,侵删)

凯氏定氮法 凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1833年建立的,现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等,是分析有机化合物含氮量的常用方法。

测定蛋白质含量的方法有:凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法、考马斯亮蓝法等。凯氏定氮法 凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。

蛋白质简单检测方法

1、蛋白质简单检测方法:变色试剂法、尿液测定法、低ryg钙素亲和层析法、BCA法或Lowry法。变色试剂法:例如用布拉德福试剂、比尔斯试剂等进行反应,会产生颜色变化,可以通过颜色的变化程度或者光密度的测量来估算蛋白质的含量。尿液测定法:尿液中的蛋白质含量可以作为一种快速检测指标。

2、间接测定法:蛋白质与某些酸性或碱性色素分子结合形成不溶性的盐沉淀。用分光光度计测定未结合的色素,以每克样品结合色素的量来表示蛋白质含量的多少。

3、【答案】:蛋白含量的测定常用的方法有:考马斯亮兰G-250染色法、双缩脲法、福林一酚试剂法、紫外吸收法。(1)考马斯亮兰G-250染色法:考马斯亮兰G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色,在595nm处有最大的光吸收,其颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

关于蛋白质含量实验和蛋白质含量测定实验的介绍到此就结束了,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于蛋白质含量测定实验、蛋白质含量实验的信息别忘了在本站搜索。

扫码二维码