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外泌体蛋白质组分析-外泌体蛋白浓度检测

蛋白质工程 11个月前 (06-16) 125

接下来为大家讲解外泌体蛋白质组分析，以及外泌体蛋白浓度检测涉及的相关信息，愿对你有所帮助。

文章信息一览：

外泌体——是一类有细胞释放的细胞外囊泡。外泌体的特点见正文。细胞外囊泡——简称EV，是由细胞释放的各种具有膜结构的囊泡结构统称，这些囊泡的直径可以从30、40nm到9um。细胞外囊泡有不同的亚群，而目前研究最火热的是外泌体这个亚群。

外泌体（Exosomes）是一种双磷脂膜囊泡，含有蛋白、脂质及核酸等多种成分，是细胞外囊泡的一种。外泌体体积小，直径在40～200 nm，在透射电镜下具有典型的杯状结构。几乎所有的细胞都分泌外泌体，外泌体在细胞间的连接中发挥重要作用。

（图片来源网络，侵删）

外泌体（exosome， EXO）是一类直径40-100nm的细微囊泡，能够将脂质、糖分、蛋白、mRNA、miRNA和DNA等生物分子从一个细胞传送到另一个细胞，进而互换遗传物质、重程序编写寄主细胞，开展细胞间通信。

外泌体是细胞分泌的一种微小膜泡，里面含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸，可以用于基因治疗，也可以用于癌症的诊断和治疗。基因治疗：在基因治疗中，递送遗传物质是重要的环节，而外泌体膜泡具有运输和传递的功能，通过外泌体将基因载体递封装、传送，一般不会伤害到基因物质。

液体活检样本中的蛋白质组具有巨大复杂性，如蛋白质丰度和翻译后修饰持续且快速的变化，同时蛋白质组技术与高度复杂的测序技术相比仍存在一定局限性，导致蛋白质组学的探究仍然落后于基因组技术，且目前临床转化效率极低，仅通过40多个基于液体活检的蛋白组生物标志物。

（图片来源网络，侵删）

蛋白质组概述及其相关研究技术和方法鉴于基因组研究的局限性，1994年澳大利亚Macquaie 大学的Wilkins和Williams等在意大利的一次科学会议上首次提出了蛋白质组（Proteome）这个概念。

重组药物最大的一类是重组人***，近5年销售总额近430亿美元；以后依次是重组胰岛素（除“重磅***”外，总销售额用Novo Nordisk的相应产品销售额进行调整，因为该公司占有胰岛素市场的近50%份额）、β干扰素、GM-CSF、融合蛋白Enbrel以及α干扰素（图2）。

AD患者中beta/gamma和低频段间CFC强度增强，反映了同步性增加，同样表明神经元网络的复杂性减弱，需要更多的神经资源来维持大脑静息状态。Gamma频率范围、测量技术（即功率、相干性、同步性等）、疾病的严重程度和AD患者的药物治疗状况等研究方法或许会导致差异。

外泌体即细胞外囊泡（简称EVs）是所有细胞主动分泌的纳米级囊泡，活细胞释放不同类型的细胞外囊泡进入细胞外环境进行细胞间交流，细胞外囊泡越来越多地被认为是有希望的液体活检生物学标志物。

外泌体是直径为40～100nm，密度为10～18g/mL的双层脂质结构的小囊泡，起初它被认为是细胞代谢的副产物，但近年的研究发现，外泌体在细胞通信方面发挥作用，是细胞旁分泌的介质，具有重要的细胞间调节功能。外泌体可以在细胞之间转移DNA、RNA或蛋白质，从而影响受体细胞的功能。

1、首先要了解microRNA的分布，例如在血浆中microRNA有三种分布形式：游离状态、与蛋白结合形成复合体、包涵在囊泡中（外泌体是囊泡的一种）。这样就清楚了，直接提是提全部，外泌体提取只针对一部分。

2、放置10小时。外泌体的细胞上清是一种宝贵的样本，为了保持其质量和完整性，存储和处理时需要注意适当的条件，外泌体的细胞上清可以在4℃下放置数小时到数天具体的时间可以根据实验需求和样本稳定性来确定。

3、植物外泌体是一种被植物细胞分泌的小囊泡，其大小通常在50-1000纳米之间，内含不同种类的生物学分子，如蛋白质、核酸、脂质、糖类等。叶绿素是一种在植物中广泛存在的绿***素，具有光合作用的功能。

4、样品制备过程中没有充分提取外泌体，样品中含有其他杂质或干扰物质，实验操作不当。样品制备过程中没有充分提取外泌体。在制备样品时，需要使用特定的方法来提取外泌体，并确保其完整性和纯度。如果提取过程不充分或不正确，会导致外泌体浓度降低。样品中含有其他杂质或干扰物质。

外泌体的保存对于外泌体的保存，和其他分子样品一样，提取的外泌体低温保存即可，短时间（一周之内）可放4度，长时间放-20或-80。也有人认为放4度更好，怕低温冻融会影响外泌体的完整性，但目前还没有一个定论，而且大部分文献认为没有影响。

外泌体是EV的一种，平均直径约100纳米。外泌体的生物发生涉及其起源的内体，随后与其它细胞内囊泡和细胞器的相互作用产生外泌体的最终内含物。它们的各种成分包括可以反映其起源细胞的核酸、蛋白质、脂质、氨基酸和代谢产物。

外泌体是由干细胞分泌的微小囊泡（30-50纳米宽）。他们类似于细胞间的通讯器，可以转移DNA，RNA或蛋白质，影响细胞功能。研究表明，来自不同来源外泌体都可以促进皮肤细胞增殖，并加速表皮再生。

关于外泌体蛋白质组分析，以及外泌体蛋白浓度检测的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。