蛋白质c端测序多次-测定蛋白质c端的方法

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• 1、常用于蛋白质多肽链N端.C端测定的方法有几种
• 2、常用于蛋白质多肽链N端。C端测定的方法有几种?基本原理是什么??_百度...

常用于蛋白质多肽链N端.C端测定的方法有几种

1、将带有标记的蛋白质分离出来，用胰蛋白酶水解肽链，用纸层析法分离水解碎片并测定所含放射性强度。从实验结果中发现，反应4分钟后，只有竣基端含有3H-亮氨酸。

2、显色步骤：在点有样品的滤纸上喷试剂①后，在空气中吹几分种，再喷试剂②。精氨酸或含精氨酸的多肽显红色。此试剂对含精氨酸的蛋白质也适用。（2）第二种方法：试剂：①1g/L 8-羟基喹啉的丙酮溶液。

3、氏定氢法是经典的标准方法，但现已不多用。双缩限法常用于需要快速但并不需要十分精确的测用于白质纯化的头几个步骤的测定。

4、蛋白质由n端走向c端是指蛋白质生物合成过程中的氨基酸排列走向。N端是“氮”，是—NH ，读氨基；氨基（Amino）是有机化学中的基本碱基，所有含有氨基的有机物都有一定碱的特性，由一个氮原子和两个氢原子组成。

5、从实验结果中发现，反应4分钟后，只有竣基端含有3H-亮氨酸。随着反应时间的延长，带有标记的肽段自羧基向N端延伸，到60min时，几乎整个肽断都布满了标记物。这个实验说明多肽链的合成是从N端向C端进行的。

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C-末端分析A.肼解法：这是测定C-末端最常用的方法。将多肽溶于无水肼中，100℃下进行反应，结果羧基末端氨基酸以游离氨基酸状释放，而其余肽链部分与肼生成氨基酸肼。

步骤四：氨基酸组成分析接着，我们分析每个肽链的氨基酸组成，计算出分子比，这是理解蛋白质结构的关键信息。步骤五：N端与C端定位 N端和C端的氨基酸特性不同，N端更为重要。

C端氨基酸残基分析，可用；羧基肽酶，肼解法；二是串联质谱测定多肽链氨基酸测序。氨基酸（amino acid）：含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。

测定蛋白质中的氨基酸组成。2。蛋白质N端和C端的测定。3。应用两种或两种以上的水解方法将索要的蛋白质肽链断裂，各自得到一系列大小不同的肽段。4。分裂提纯产生的肽，测定他们的序列。5。

在多肽链的含有游离氨基的一端称为肽链的氨基端或N端，而另一端含有一个游离羧基的一端称为肽链的羧基端或C端。蛋白质的二级结构是指多肽链骨架盘绕折叠所形成的有规律性的结构。

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