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蛋白质体外结合实验-蛋白质体外表达原理

蛋白质工程 1年前(04-04) 174

今天给大家分享蛋白质体外结合实验，其中也会对蛋白质体外表达原理的内容是什么进行解释。

文章信息一览：

【答案】：是用化学免疫法鉴定蛋白质的技术。用凝胶电泳分离蛋白质，将其转移到硝酸纤维素膜上，之后用特殊的抗体与对应的蛋白质（抗原）结合染色来鉴定它。这项技术是鉴定基因表达产物所不可缺少的。

具体实验步骤如下：构建酵母表达载体：将含有自身***元件2μ、酵母转录起始序列、选择性筛选的标记基因等元件的酵母表达载体与感兴趣的蛋白质基因融合，在表达载体中得到融合基因。

（图片来源网络，侵删）

Western杂交的总体过程也与Southern杂交相似，印迹转移的是蛋白质，这种将蛋白质样品从SDS-PAGE凝胶通过电转移方式转移到滤膜的方法，称为Western：blotting。

【答案】：以发明者命名的3种分子杂交技术为：（1）Soutliern Blotting：特指DNA印迹杂交；（2）Northern Blotting：特指RNA印迹杂交；（3）Western blotting：特值蛋白质印迹杂交。

根据检测结果，从而可得知被检生物（植物）细胞内目的蛋白的表达与否、表达量及分子量等情况。

（图片来源网络，侵删）

1、甲、乙两组），体外模拟细菌转录的过程，甲组加适量抗生素，乙组加等量蒸馏水，检测两组实验中RNA的生成量。通过这两组实验探究抗生素抑制细菌蛋白质合成是否为第一种假设。

2、选择D。“尼伦伯格和马太破译第一个遗传密码的实验，每个试管中加入了一种氨基酸，再加入除去了DNA和RNA的细胞提取液，以及人工合成的RNA多聚尿嘧啶核苷酸。

3、要探究这种抗生素能否阻断细菌DNA和人体DNA的转录过程，需要设置对照实验，实验变量为抗生素的有无，而观察指标为是否有RNA生成。因要探究抗生素对人体DNA和细菌DNA转录的影响，故需有两组对照。

4、克里克和他的同事通过大量的实验，以T4 噬菌体为材料，研究其中某个基因的碱基的增加或减少对其所编码的蛋白质的影响，结果表明只可能是遗传密码中的3个碱基编码1个氨基酸。

5、需要。根据查询知乎显示，尼伦伯格和马太的实验中，需要除去细胞提取液中的氨基酸。该实验的目的是建立体外蛋白质合成系统，以研究蛋白质的合成过程。

1、pull-down：带内部下拉（电阻）的输入 output with internal pull-up：带内部上拉（电阻）的输出上拉就是将不确定的信号通过一个电阻嵌位在高电平，电阻同时起限流作用，下拉同理。

2、pull in：吸引，拉拢（人群、观众或选民）。pull out：撤出（协议、比赛或组织）；（使）（部队）撤出，（使）摆脱（经济衰退）。

3、pull-down，胞外纯化蛋白后证明两个蛋白之间有相互作用，这个相互作用必然是直接相互作用。

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