基因工程转化方法有哪些-基因工程基因转化方法

今天给大家分享基因工程转化方法有哪些，其中也会对基因工程基因转化方法的内容是什么进行解释。

文章信息一览：

• 1、基因工程中将目的基因导入植物细胞最常用的方法是什么?
• 2、基因工程中较容易被转化的植物有什么?
• 3、如何利用基因工程技术和植物细胞工程技术获得转基因植株
• 4、植物转基因技术有那些步骤和流程?
• 5、基因工程的基本过程主要包括哪些?
• 6、在基因工程中,如何将Ti质粒构建为转化载体?

基因工程中将目的基因导入植物细胞最常用的方法是什么?

将目的基因导入植物细胞***用最多的方法是农杆菌转化法（农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。

将目的基因导入植物细胞的方法包括：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。其中，农杆菌转化法是用的最多的方法，主要是针对双子叶植物和裸子植物。基因工程的原料就是目的基因。所谓目的基因，就是指已被或欲被分离、改造、扩增和表达的特定基因或DNA片段，一般能编码某一产物或控制某一性状。

如果考试题目问你把目的基因导入植物细胞最常用的方法，答案就是农杆菌转化法 2。一般很少考到花粉管通道法、基因枪法，例如单子叶植物一般用基因枪法，绿色开花植物可***用花粉管通道法，因为容易操作且经济实惠 3。如果考试题目问你把目的基因导入动物细胞那就是用显微注射法 4。

高中阶段接触到的有：农杆菌转化法，基因枪法，花粉管通道法 花粉管通道法是我国自主研发的，成本较低，而基因枪法成本较高。

级别：二年级 将目的基因导入受体细胞（转化）是基因工程的第三步。根据受体细胞种类不同，可分三种情况：受体细胞是植物细胞，有三种方法：农杆菌转化法，基因枪法（或微弹轰击法），花粉管通道法；受体细胞是动物细胞，方法是：显微注射技术；受体细胞是微生物细胞，方法是：Ca2+处理法。

基因工程中较容易被转化的植物有什么?

能进行一般组织培养，大花烟草、苜蓿、水稻（主要是日本青、中花11等），***用基因枪法、农杆菌法转化。能够进行原生质体悬浮细胞培养等，胡萝卜、大花烟草等，超声波、电转、PEG介导等。具有较好的实验条件丰富的实验经验，几乎所有品种都可以很好地转化。

矮牵牛是遗传转化研究最深入的花卉作物。目前对郁金香、吊兰、石蒜、百合、朱顶红、水仙、唐菖蒲、鸭趾草、花烛、花叶芋、石带兰、伽蓝菜、丝石竹、香石竹、罂粟、金鱼草、非洲菊、菊花、月季等花卉的遗传转化也有报道，部分花卉获得分子证据的转基因植株。

据统计，到1999年初，美国农业部已经批准生产的转基因农作物有七大类35种，其中晚熟西红柿5种，耐除莠剂的大豆2种，增加月桂酸脂的油菜籽1种，抗虫马铃薯2种，抗虫和抗除莠剂的玉米6种，抗病番木瓜2种。仅仅这两种番木瓜，就挽救了美国夏威夷番木瓜产业。

拟南芥 水稻 烟草 短柄草等 基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。

如何利用基因工程技术和植物细胞工程技术获得转基因植株

直接转入法 这是将***的DNA直接导入植物细胞，然后将这些细胞在体外培养再生出植株。***的DNA的转化效率较低，因而要辅之以高效率的组织培养系统。植物细胞有一层很厚的细胞壁，因此需先去除植物细胞壁，使之成为原生质体，然后用来直接转入外源DNA。

直接转入法：此方法涉及将***的DNA直接导入植物细胞，并在体外培养条件下使其再生出植株。由于转化效率较低，通常需要结合高效的组织培养技术。为了实现转化，植物细胞壁需被去除，使细胞成为原生质体。此外，也可以使用显微操纵技术或“基因枪”将DNA直接注入植物细胞。

植物细胞工程技术是一种通过基因工程手段对植物进行改良的方法，可以通过以下几个步骤来改良作物：基因克隆：首先需要克隆出与目标性状相关的基因，可以通过PCR、cDNA克隆等方法进行。基因转化：将克隆的基因导入到植物细胞中，可以通过农杆菌介导转化、生物质粒介导转化等方法进行。

植物转基因技术有那些步骤和流程?

在一个典型的转基因植物生产过程中，这些步骤分别称为目的基因克隆、载体构建、转化、重组，以及筛选。基因克隆必须得有这个需要被转的基因。现在最广泛使用的BT蛋白基因和抗草甘膦基因，就来自于两种细菌。因此，细菌来源的基因，也可以在植物中起作用。

目的基因的获取 将目的基因与载体连接并转化大肠杆菌 筛选并扩繁阳性大肠杆菌 提取重组子 转化农杆菌 筛选并扩繁阳性农杆菌 利用农杆菌侵染植物***官 筛选阳性*** 自交或回交以稳定阳性植株 以上步骤是植物转基因实验的一般流程。

利用聚合酶链反应（PCR）技术，能够从原生物的基因组中精确地克隆出所需的基因片段。 载体构建：接下来，将目的基因通过特定的酶连接到质粒分子上，形成一个含有目的基因的新质粒分子。 转化：在这一步骤中，通常使用农杆菌作为载体将基因转移到植物细胞中。

目的基因克隆：首先，通过序列比对和分析确定目标基因，随后使用PCR技术从生物体的基因组中提取并***出目的基因。 载体构建：接下来，将目的基因通过特定的酶切技术连接到质粒DNA上，形成一个载体，该载体能够将目的基因插入到植物细胞中。

基因工程的基本过程主要包括哪些?

1、基因工程的核心是将目的基因用DNA连接酶在体外连接到合适的载体DNA.上，形成重组DNA。根据目的基因片段末端的性质，以及质粒载体与外源DNA上限制酶切位点的性质，可***用黏端连接法或平端连接法。

2、【答案】：基因工程的基本过程：目的基因的获得→重组载体的构建→重组载体导入宿主细胞→阳性重组子的筛选→基因的测序和鉴定→基因的控制表达。每一个环节都离不开微生物的参与。

3、【答案】：重组DNA的主要步骤主要包括以下4个基本步骤：（1）目的基因的获得；（2）目的基因与载体分子在体外进行连接反应，形成重组体；（3）将人工重组的DNA分子导入能进行正常***的寄主细胞，从而得到***：（4）重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。[考点]重组DNA的过程。

4、这是基因工程的第四步工作。 以上步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。因此，必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。

在基因工程中,如何将Ti质粒构建为转化载体?

目前主要***用两种Ti质粒基因转化载体系统，即共整合载体系统和双元载体系统（binaryvectorsystem）。共整合载体Ti质粒上的T-DNA区编码致瘤基因序列，一般为pBR322质粒DNA所取代，但保留两末端重复序列。

是 构建转化载体的质粒。 （4）卸甲载体：是解除武装的Ti质粒或Ri质粒，是构建转化 载体的受体质粒。 （5）植物基因转化载体：是最后用于目的基因导人植物细胞 的载体，亦称工程载体。它是由中间表达载体和卸甲载体构 建而成。

农杆菌的Ti质粒可以作为载体。Ti质粒上有两个区域，一个是T-DNA区，这是能够转移并整合进植物受体的区段；另一个是Vir区，它编码实现质粒转移所需的蛋白质。

农杆菌介导法：农杆菌的Ti质粒可作为载体，包含T-DNA区和Vir区。外源基因首先克隆到大肠杆菌质粒上，然后转入不含T-DNA的农杆菌中，通过同源重组整合到Ti质粒上。接着，利用这些农杆菌转化植物细胞，实现外源基因的转移和整合。

一是决定植物形成冠瘿瘤；二是控制冠瘿碱的合成。所以Ti质粒是诱发植物肿瘤的质粒。根据Ti质粒能够进入植物细胞并能整合到植物染色体DNA分子中的功能，将外源基因装入到Ti质粒，形成杂合Ti质粒并转入农杆菌中，然后该农杆菌感染植物细胞，从而形成转基因植物。

Ti质粒是运载体，携带目的基因。但是不能缺少农杆菌（生物工程中的农杆菌转化法），原因如下 ： Ti质粒存在于农杆菌中 只有将目的基因导入像农杆菌这样的载体，农杆菌可以自行将目的基因插入到Ti质粒上，这是其他细菌所没有的生理功能。

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