使蛋白质沉淀的盐-使蛋白质沉淀的试剂有哪些
今天给大家分享使蛋白质沉淀的盐,其中也会对使蛋白质沉淀的试剂有哪些的内容是什么进行解释。
文章信息一览:
蛋白质的盐析可以用哪些盐
蛋白质在用盐析沉淀分离后,需要将蛋白质中的盐除去,常用的办法是透析,即把蛋白质溶液装入透析袋内(常用的是玻璃纸),用缓冲液进行透析,并不断的更换缓冲液,因透析所需时间较长,所以最好在低温中进行。此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐,所用的时间就比较短。
蛋白质盐析的条件是加入的是轻盐,硫酸铜因为是重金属盐所以不会发生盐析。
蛋白质盐析常用中性盐。主要有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠等。应用最广泛的是硫酸铵,其优点是:1.溶解度大 25℃时硫酸铵的溶解度可达1mol/L(541g/L)以上。大约每升水可溶解767g之多。在这一高溶解度范围内,许多蛋白质和酶都可以被盐析沉淀出来。
因素能使蛋白质沉淀而不变性的有
1、蛋白沉淀不一定是蛋白质变性。盐析就是例子,盐析也可以让蛋白质沉淀,虽然脱去水化层,肽链未转变为伸展状,二级以上结构为变化。一般认为蛋白质的二级结构和***结构有了改变或遭到破坏,都是变性的结果。
2、有机溶剂:利用它们的强亲水性破坏水化膜,由于它们不能中和蛋白质所带电荷,需要在pI附近沉淀蛋白质。低温条件下,变性发生缓慢,可用来制备血浆蛋白质。常温下会变性。重金属盐:带负电荷的蛋白质与带正电荷的重金属离子结合形成不溶性盐而沉淀。用时,需调节pH,使其大于pI,一般会发生变性。
3、变性现象是由于分子内部的结构发生了改变。天然蛋白质分子内部通过氢键等化学键联系使整个分子具有紧密的结构,变性后,氢键等次级键被破坏,蛋白质分子就从原来有秩序的紧密结构变为无秩序的松散结构。而沉淀作用中蛋白质不变性,破坏蛋白质胶体及同种电荷可使蛋白质沉淀。
4、蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象,变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素,即颗粒表面的水化层和电荷。若无外加条件不致互相凝集。
关于使蛋白质沉淀的盐,以及使蛋白质沉淀的试剂有哪些的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。
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