基因工程中基因克隆-基因工程克隆载体应具备哪些基本条件?

文章信息一览：

• 1、基因克隆是什么意思?
• 2、什么是基因克隆。。还有简述一下基因克隆的应用前景
• 3、怎样克隆一个目的基因?
• 4、什么是基因克隆?
• 5、什么叫基因克隆
• 6、基因克隆的基本步骤有哪些

基因克隆是什么意思?

基因，简单来讲就是编码蛋白的一段DNA序列，复杂的基因包含调控序列和编码区等。克隆，英文是clone或者cloning，一种无性繁殖的过程或者无性繁殖。

克隆：克隆通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的的无性生殖方式（如植物）。一个克隆就是一个多细胞生物在遗传上与另外一种生物完全一样。我们通常所说的克隆是指通过有意识的设计来产生的完全一样的克隆。在生物学上，克隆通常用在两个方面：克隆一个基因或是克隆一个物种。

．在分子水平，克隆一般指DNA克隆（也叫分子克隆）。含义是将某一特定DNA片断通过重组DNA技术插入到一个载体（如质粒和病毒等）中，然后在宿主细胞中进行自我***所得到的大量完全相同的该DNA片断的“群体”。2．在细胞水平，克隆实质由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的一个细胞群体。

所以在那篇发表于19***年2月出版在《Nature》杂志上的轰动性论文中，作者并没有把“多莉”说成是一个克隆。另外，克隆也可做动词用，意思是指获得以上所言DNA、细胞或个体群体的过程。

转基因改变了物种的遗传基因，克隆只是***物种。

什么是基因克隆。。还有简述一下基因克隆的应用前景

基因克隆（gene cloning）或分子克隆，又称为重组DNA技术，是应用酶学方法，在体外将不同来源的DNA分子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合分子，并使之在适当的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代DNA分子的过程。例如，要获得人类基因组中的某个基因，我们就需要借助基因克隆技术，进行目的基因的分离、克隆和扩增。

所谓的克隆技术实质就是转基因。向某生物体转入他本身没有的基因，从而实现特定效果。比如现在很普遍的抗虫棉，就是把一种叫做Bt蛋白的基因转入棉花中，这种Bt蛋白基因在棉花中表达后，产生Bt蛋白，Bt蛋白对鳞翅目等棉花常见昆虫有杀死作用，从而避免大量的化学农药的使用，降低农药污染。再比如番茄。

用途：是用于从已知cDNA片段扩增全长基因的方法。（2）应用cDNA差示分析法克隆基因 基本原理：该法充分发挥了PCR技术以指数形式扩增双链DNA模板的特性，通过降低cDNA群体复杂性和更换cDNA两端接头等方法，特异性扩增目的基因片段。

基因克隆是70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术，可概括为∶分、切、连、转、选。最终目的在于通过相应技术手段，将目的基因导入寄主细胞，在宿主细胞内目的基因被大量的***。基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。

怎样克隆一个目的基因?

应用cDNA差示分析法克隆基因 基本原理：该法充分发挥了PCR技术以指数形式扩增双链DNA模板的特性，通过降低cDNA群体复杂性和更换cDNA两端接头等方法，特异性扩增目的基因片段。因为试验对象和供试探针在接受差示分析前均经一个4碱基切割酶处理，形成平均长度256bp的代表群，保证绝大部分遗传信息能被扩增。

不断缩小筛选区域，逐步向目的基因靠近，最终克隆到该基因。转座子标记法 转座子（transposon）是可从一个基因位置转移到另一位置的DNA片段，而原来位置的DNA片段（转座子）并未消失，发生转移的只是转座子的拷贝。基因转座可引起插入突变，使插入位置的基因失活，并诱导产生突变型。

核酸分子杂交法：制备目的基因特异的核酸探针，通过核酸分子杂交法从众多的转化子中筛选目的克隆。目的基因特异的核酸探针可以是已获得的部分目的基因片段，或目的基因表达蛋白的部分序列反推得到的一群寡聚核苷酸，或其它物种的同源基因。

基因克隆是一种通过人工手段将一个特定的基因***并插入到另一个生物体的基因组中的技术，被广泛应用于基因工程和生物医学研究领域。其基本原理包括： 提取目标基因：首先从目标生物体中提取需要克隆的基因，通常***用PCR或限制性酶切等方法来从基因组DNA中放大或切割出目标基因。

①如果目的基因序列是已知的，或部分序列是已知的，探针可以从已有的克隆中制备，或用PCR方法扩增。②如果目的基因是未知的，而有其他物种的同源序列，那么可以用同源序列做探针。③如果目的基因未知，但知道它对应的蛋白质序列，可根据蛋白质序列设计相应的核酸探针。

简单的说一下：扩增目的基因，比如通过PCR的方法。PCR扩增的序列可以通过酶切或者TOPO TA的方法插入到载体质粒。转染大肠杆菌 筛选阳性克隆一般常***用蓝白克隆方法，就是在载体上，序列的插入位置本来是一个完整编码β-gal这个酶的序列，如果不被破坏，产生的酶可以降解细菌培养盘上的底物，形成蓝色产物。

什么是基因克隆?

1、基因移植是对人体异常的基因进行置换或引入外源基因以可以克服由于人体的某些基因或染色体异常造成遗传病。人们通过现代生物学技术检查出人体哪些基因是“好基因”，哪些基因是“坏基因”，哪些基因是正常基因，哪些基因是非正常基因或致病的突变基因。

2、区别： 克隆是对单体的***，这和转基因有着很大的不同。转基因技术可以保持生物基因的多样性，而克隆却没有什么帮助，反而有一定的威胁。 转基因技术和克隆技术都是属于基因技术的范畴，将转基因技术与动物克隆技术有机结合形成的转基因克隆技术，在畜牧业上应用使转基因动物生产效率大为提高。

3、DNA克隆在本世纪50年代初，生物学家对遗传物质的载体是 DNA（而不是以前长期所认为的蛋白质）这一事实已经没有什么疑问了；对DNA的化学组成（4种核苷酸通过磷酸二酯键共价连接而成的长链分子）和分子结构（双螺旋）也有了清楚的认识。

4、克隆技术也是这样。如果克隆技术被用于“***”像希特勒之类的战争狂人，那会给人类社会带来什么呢？即使是用于“***”普通的人，也会带来一系列的***道德问题。如果把克隆技术应用于畜牧业生产，将会使优良牲畜品种的培育与繁殖发生根本性的变革。

什么叫基因克隆

因此基因克隆技术又称为分子克隆、基因的无性繁殖、基因操作、重组DNA技术以及基因工程等。 ***用重组DNA技术，将不同来源的DNA分子在体外进行特异切割，重新连接，组装成一个新的杂合DNA分子。在此基础上，这个杂合分子能够在一定的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代分子，此过程叫基因克隆。

基因克隆是70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术，可概括为∶分、切、连、转、选。最终目的在于通过相应技术手段，将目的基因导入寄主细胞，在宿主细胞内目的基因被大量的***。基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。

基因克隆 ：也叫分子克隆，是在体外对DNA分子按照既定的目的和方案进行人工重组，将重组分子导入到合适的受体细胞中，使其在细胞中扩增和繁殖，以获得DNA分子大量***，并使受体细胞获得新的遗传特征的过程。

基因（遗传因子）是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。

什么是基因？ 含特定遗传信息的核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。除某些病毒的基因由核糖核酸（RNA）构成以外，多数生物的基因由脱氧核糖核酸（DNA）构成，并在染色体上作线状排列。基因一词通常指染色体基因。在真核生物中，由于染色体都在细胞核内，所以又称为核基因。

基因克隆的基本步骤有哪些

基因克隆的基本过程包括：①目的基因的获取；②克隆载体的选择与构建；③目的基因与载体的连接；④重组DNA分子导入受体细胞；⑤重组体的筛选。

利用DNA重组技术在大肠杆菌细胞中克隆外源基因的基本过程通常包括以下步骤：DNA提取：从源生物体中提取所需的外源DNA片段，可以通过PCR扩增、酶切等方法获取特定的DNA序列。载体准备：选择适当的载体，常用的是质粒（pla***id）。质粒是环状的DNA分子，可以在细菌细胞中自主***。

简单的说一下：扩增目的基因，比如通过PCR的方法。PCR扩增的序列可以通过酶切或者TOPO TA的方法插入到载体质粒。转染大肠杆菌 筛选阳性克隆一般常***用蓝白克隆方法，就是在载体上，序列的插入位置本来是一个完整编码β-gal这个酶的序列，如果不被破坏，产生的酶可以降解细菌培养盘上的底物，形成蓝色产物。

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