电泳测蛋白质-电泳测蛋白质含量的原理

文章阐述了关于电泳测蛋白质，以及电泳测蛋白质含量的原理的信息，欢迎批评指正。

文章信息一览：

• 1、蛋白质在电泳时的移动速率取决于
• 2、如何用page测蛋白质的分子量
• 3、电泳分离蛋白质的依据是
• 4、sds-page电泳分离蛋白质的原理,这种方法为什么可以测定蛋白质分子量
• 5、醋酸纤维素薄膜电泳测定血清蛋白质有什么临床意义
• 6、电泳法测定蛋白质含量的适用范围

蛋白质在电泳时的移动速率取决于

蛋白质在sdspage过程中，因为SDS会在蛋白质分子中大量的聚合，蛋白质所带电荷数会被覆盖掉。所以，在sds电泳中，其实只与蛋白质分子量相关，分子量越小，跑得越快。

而pH值的变化则会影响蛋白质颗粒表面电荷的性质和数量，从而影响其在电场中的移动速率。电场的强度也会影响蛋白质颗粒受到的电场力，进而影响其在电场中的移动速率。

影响电泳迁移率的因素有：电场强度：电场强度是指每lcm的电位降，亦即电势梯度。电场强度愈高，带电质点移动速度也愈快。溶液的pH值：溶液的pH值决定了化合物解离的程度，也决定了质点所带的净电荷。

小的运动快。基本的物理学常识：加速度a = F/m = qE/m ；速度v = at 同一个电场，E 相同。加速度与质量m成反比。带电量相同的话，质量小的就运动快。

当pH值低于等电点时，蛋白质带正电荷，向负电极移动；当pH值高于等电点时，蛋白质带负电荷，向正电极移动。因此，pH值也是影响蛋白质在电场中泳动方向的重要因素之一。

如何用page测蛋白质的分子量

1、怎样利用sds-page法测定某种蛋白质的分子量如下：电泳定义：带电荷的颗粒在电场的作用下向其电 性相反的的方向移动。电泳分类： 按电荷量分离 按分子量分离 按等电点分离。SDS-PAGE应用：测分子量；分离鉴定。

2、SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，是一种间断的电泳系统，通常用于分离分子量在5—250kDa之间的蛋白质。

3、在混合样品中各蛋白质组分的迁移率主要取决于分子大小和形状以及所带电荷量。

4、SDS-PAGE判定蛋白质的分子量：定义：R＝de/do R为迁移率，de为蛋白质电泳迁移距离，do为溴酚蓝电泳迁移距离 则lgM=a-bR M为蛋白质分子量，a、b为常熟，a、b可由标准蛋白质（已知分子量的蛋白质）的迁移率算出。

电泳分离蛋白质的依据是

用电泳方法分解蛋白质基于蛋白质在电场中的电荷和大小的差异。在一定的pH条件下，不同蛋白质具有不同的等电点，电荷性质和分子大小。在电泳中使用一个电场，使带电的蛋白质在凝胶或电泳介质中进行移动。

用电泳方法分解蛋白质的原理，是在一定的ph条件下，不同蛋白质的带电荷量、分子大小和分子形状。电泳 电泳是电泳现象的简称，指的是带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。

***结构。所以和蛋白质的稳定性，活性，疏水性，等电点都没关系。而2-ME是还原剂，能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂，所以和二硫键也没有关系。综上所述SDS-PAGE电泳技术是根据蛋白质的分子量不同来分离蛋白质的。

sds-page电泳分离蛋白质的原理,这种方法为什么可以测定蛋白质分子量

【答案】：（1）聚丙烯酰胺凝胶是一种凝胶介质，蛋白质在其中的电泳速度决定于蛋白质分子的大小、形状和所带电荷数量。

在SDS-PAGE中，SDS-复合物的迁移率不再受蛋白的电荷和形状的影响，而只与蛋白质的分子量正相关。

因而消除了蛋白质原有的电荷差别，使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量，而与蛋白质所带的电荷无关，在一定条件下，蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈负相关。

sds分离靠的是在电场中蛋白质分子跟page的结合后的分子量大小从而在凝胶中跑的速度不同而分开的。分子筛是根据不同分子量的分子大小不同，从而进行蛋白质分离，达到测量分子量的目的的。

SDS还可以用于测定蛋白质的分子量。在SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）实验中，我们可以通过比较不同样品中SDS-蛋白质复合物的迁移距离来确定它们的分子量。

醋酸纤维素薄膜电泳测定血清蛋白质有什么临床意义

1、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳与滤纸相比较，有以下优点 。（1）醋酸纤维素薄膜对蛋白质样品吸附极少，无“拖尾”现象，染色后背景能完全脱色，各种蛋白质染色带分离清晰，因而提高了测定的精确性。

2、载体 由于载体成分及做工不同，对血清蛋白吸附、分离等能力不同会造成电泳结果的差异[3]。

3、醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、廉价。已经广泛用于血清蛋白，血红蛋白，球蛋白，脂蛋白，糖蛋 白，甲胎蛋白，类固醇激素及同工酶等的分离分析中，尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低，但它具有简单，快速等优点。

4、因为血清蛋白中的各种蛋白质在电泳时移动的速度不一样，在电泳的过程中就会产生不同的区带，根据区带的情况就可以判断一个人的健康状况。

5、代之以***用支持介质的区带电泳。区带电泳因所用支持体的种类、粒度大小和电泳方式等不同，其临床应用的价值也各有差异。

6、同时，由于其具有浓缩效应、电荷效应和分子筛效应，聚丙烯酰胺凝胶电泳具有极高的分辨率。醋酸纤维素薄膜对蛋白质样品吸附极少，无拖尾现象，染色后背景能完全脱色，各种蛋白质染色带分离清晰，因而提高了测定的精确性。

电泳法测定蛋白质含量的适用范围

1、SDS-PAGE并不适合所有的蛋白质 比如蛋白相对分子量过大或者过小、结构特殊的蛋白、带有较大辅基的蛋白、表面电荷较多的蛋白等等都不适合SDS-PAGE检测。

2、因为通过生化方法吧蛋白提取出来，蛋白质带有电荷么，是将混合样品中的蛋白质，其原理是第一向基于蛋白质 PI 不同用等电聚焦，电泳时的正极与负极都会发生电解反应，向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。

3、M 蛋白的检测方法主要有琼脂或琼脂糖电泳、免疫电泳、免疫固定电泳、选择免疫电泳等。M蛋白的鉴定 1．多发性骨髓瘤与巨球蛋白血症时的M 蛋白检测和鉴定 （1）血清总蛋白定量。

4、应用范围广，可用于蛋白质、酶、核酸等生物大分子的分离、定性、定量及少量的制备，还可测定分子量、等电点等。等电聚焦电泳 ：等电聚焦电泳是利用具有pH梯度的电泳介质来分离等电点（pI）不同的蛋白质的电泳技术。

5、高效毛细管电泳的临床应用 1 血清蛋白质分析 ***用CE分离血清蛋白获得的效果，并能准确计算各蛋白质的相对浓度，避免了凝胶电泳法染色，脱色过程中多种影响因素造成的误差，HPCE法的结果重复性好，可信度高，便于贮存和检索。

6、***用沉淀反应进行散射比浊法 用磺柳酸、三氯醋酸等配方，此方法甚为简便，不需特殊仪器，技术关键在于：①选择最佳试剂浓度及温度；②混匀技术；③选用的标准；④待测标本中的蛋白浓度。

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