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紫外吸收法测蛋白质-紫外吸收法测蛋白质含量的优缺点

蛋白质工程 1年前(05-03) 141

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1、各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。该法测定范围为0．01～1．0 mg/ml。

2、紫外分光光度法测定蛋白质含量如下：实验操作步骤：标准曲线的制作。用吸量管分别吸取0、0、0mL00ng.mL标准蛋白质溶液于5只10mL比色管中，用0.9%NaCI溶液稀释至刻度，摇匀。

（图片来源网络，侵删）

3、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白（BSA）。

4、nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白（BSA）。

5、据初步统计，浓度为0 mg/mL的1800种蛋白质及蛋白质亚基在280nm的吸光度在0.3—0之间，平均值为25+/-0.51。所以此种方法测量的准确度差一点。

（图片来源网络，侵删）

1、常见的导致变性的因素有：加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂、超声波、紫外线、震荡等。

2、取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横座标，光吸收值为纵座标绘制标准曲线。样品的测定：取2～3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。

3、利用紫外光法可以测定这些氨基酸的含量。蛋白质在280nm的紫外光吸收可以达最大值，绝大部分是由色氨酸和酪氨酸所引起的。

4、紫外吸收法：蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。

1、***用紫外光吸收法测定蛋白质含量，吸光度值为260 nm和280 nm。

2、利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。

3、各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。该法测定范围为0．01～1．0 mg/ml。

1、蛋白浓度测定的方法：紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法，不需要任何试剂，操作简单且易回收。

2、凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右，因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量（假设测定物质中的氮全来自蛋白质），即：蛋白质含量=含氮量/16%。

3、于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。紫外吸收法：大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收，这是由于蛋白质中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用于测定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。

4、Bradford法测定bai蛋白质浓度：实验原理。双缩脲法（duBiuret法）和zhiFolin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制dao，促使科学家们去寻找更好的蛋。

5、考马斯亮蓝法。考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量测定微量蛋白浓度快速、灵敏的方法。

关于紫外吸收法测蛋白质，以及紫外吸收法测蛋白质含量的优缺点的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。