蛋白质等电点实验分析-蛋白质等电点的实验报告

蛋白质工程 46

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如何确定蛋白质等电点

由于蛋白质表面离子化侧链的存在,蛋白质带净电荷。由于这些侧链都是可以滴定的(titratable),对于每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点。

蛋白质表面离子化侧链赋予了其净电荷。这些侧链是可滴定的,这意味着对于每一种蛋白质,都存在一个特定的pH值,使其表面净电荷为零,即等电点。在等电点状态下,蛋白质以两性离子形式存在,分子净电荷为零(正负电荷相等)。

蛋白质等电点实验分析-蛋白质等电点的实验报告
(图片来源网络,侵删)

关键的转折点在于其等电点,即蛋白质净电荷为零的特定pH值。在这个点上,蛋白质以两性离子的形式存在,相互间的排斥力减小,导致它们更容易聚集和沉淀。这时,蛋白质的溶解度达到最低,形成沉淀物,对物理性质如黏度、膨胀性和渗透压等也有显著影响。

交错分配法。对一种特定的蛋白质,在不同盐系统中,pH和其分配系数之间的关系应不同,而在等电点时,得到的均为不带电时分子的分配系数。对不同的盐系统,其等电点时的分配系数应相等,两条pH和分配系数关系的曲线必交于一点,该点所对应的pH值即为该特定蛋白质的等电点。

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