关于凝胶法分离蛋白质的信息

文章阐述了关于凝胶法分离蛋白质，以及的信息，欢迎批评指正。

文章信息一览：

• 1、二维凝胶电泳的方法分离蛋白质的原理是什么?
• 2、凝胶过滤法原理

二维凝胶电泳的方法分离蛋白质的原理是什么?

D电泳的基本原理是先进行等电聚焦电泳（按照pI分离），然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。

蛋白质2维电泳 1个方向是SDS-聚丙烯酰胺凝胶 主要是把蛋白质按照分子量分开 1个方向是等点聚焦 把蛋白质按照等电点的不同分开 这样就可以把不同的蛋白质尽可能的分开 有些蛋白分子量相近，但是等电点不同。而等电点相近的蛋白分子量不同。所以该方法可以把原来用一种方法无法分离的蛋白分开。

双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离，第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离，把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。

用电泳方法分解蛋白质基于蛋白质在电场中的电荷和大小的差异。在一定的pH条件下，不同蛋白质具有不同的等电点，电荷性质和分子大小。在电泳中使用一个电场，使带电的蛋白质在凝胶或电泳介质中进行移动。凝胶或电泳介质通常是聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶，可以根据需要选择不同的凝胶类型。

目前所应用的二维聚丙烯酰胺凝胶电泳体系原理是根据蛋白质的两个一级属性，即等电点和相对分子质量的特异性，将蛋白质混合物在电荷（***用等电聚焦方式）和相对分子质量两个方向上进行分离。

sds-page凝胶电泳原理是根据检体中蛋白质分子量大小的不同，使其在电泳胶中分离。SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的***结构。而强还原剂如巯基乙醇，二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。

凝胶过滤法原理

问题一：凝胶色谱法的原理 以多孔凝胶（如葡萄糖，琼脂糖，硅胶，聚丙烯酰胺等）作固定相，依据样品分子量大小达到分离目的。大分子不进入凝胶孔洞，沿多孔凝胶胶粒间隙流出，先被洗脱；小分子进入大部分凝胶孔洞，在柱中被强滞留，后被洗脱。

可以使用【凝胶柱层析法 】来分离分子量不同的三种蛋白质。大概原理是：把三种分子量不同的物质放到充满凝胶颗粒的层析柱中，然后用缓冲液洗脱。大分子会以较快的速度首先流出层析柱，而小分子需要花费较长的时间才能流经柱床，从而达到分离不同分子量蛋白质的目的。

不是的 是分子量大的先随流动相一起流出 分子量小的进入凝胶网孔 因此下来的比较慢 可以参考一下凝胶过滤的原理：凝胶层析是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。

血红蛋白先被洗脱下来 血红蛋白的分子量是67000，肌红蛋白的分子量是17000 凝胶过滤法分离原理是分子量越大的蛋白在流动相中的速度越快，所以会先被洗脱下来。

凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。猛滑伍根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。 GFC一般用于分离水溶性的大分子，如多糖类化合物。

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