标记定性蛋白质组学-无标记定量蛋白组学

文章阐述了关于标记定性蛋白质组学，以及无标记定量蛋白组学的信息，欢迎批评指正。

文章信息一览：

• 1、蛋白质组研究的研究方法技术
• 2、蛋白质组学的研究手段有哪些
• 3、蛋白质组学的研究手段有哪些?原来这里已经有回答了,还不满意,希望详尽...
• 4、TMT定量蛋白组学助力PRV-宿主细胞互作的分子机制研究
• 5、如何对特异蛋白质抗原的定性和定位

蛋白质组研究的研究方法技术

1、蛋白质组学的兴起对技术有了新的需求和挑战。蛋白质组的研究实质上是在细胞水平上对蛋白质进行大规模的平行分离和分析，往往要同时处理成千上万种蛋白质。因此，发展高通量、高灵敏度、高准确性的研究技术平台是现在乃至相当一段时间内蛋白质组学研究中的主要任务。

2、近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。等电聚焦 等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。

3、蛋白质组学研究的基础技术主要包括以下两个方面：二维电泳 （2-DE）：二维电泳是一个用于分离蛋白质的技术，其中第一维度是按照蛋白质的等电点分离，而第二维度是按照蛋白质的分子量分离。通过这种方法，可以得到蛋白质的二维图谱，每一个点代表一个或几个蛋白质。

蛋白质组学的研究手段有哪些

双向电泳（two-dimensional electrophoresis， 2-DE）与质谱（mass spectrum， MS）的结合是最常见的蛋白质组学的研究手段。双向电泳包括第一向等电聚焦（Isoelectric focusing， IEF）和第二向SDS-PAGE（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis）。

Genomic Solution可以为研究者提供除质谱外的所有蛋白质组学研究工具，包括二维电泳系统，成像系统及分析软件，胶切割系统，蛋白质消化浓缩工作站，点样工作站等；同时还可以提供相关试剂和消耗品。蛋白质相互作用的研究，酵母双杂交和噬菌体展示技术无疑是很好的研究方法。

蛋白质组学的研究方法有蛋白质鉴定、翻译后修饰、蛋白质功能确定、蛋白质靶向定量技术。蛋白质鉴定：可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术，利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。

蛋白质组学的研究策略主要包括如下：质谱法：通过测量蛋白质的质量来研究其特性，包括串联质谱技术（MS/MS）用于确定蛋白质的氨基酸序列和翻译后修饰等信息。蛋白质互作网络分析：研究蛋白质间的相互作用，揭示蛋白质在细胞内不同通路中的相互作用和功能。

抗体与蛋白质阵列技术 蛋 白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变，微型化，集成化，高通量化的抗 体芯片就是一个非常好的研究工具，他也是芯片中发展最快的芯片，而且在技术上已经日益成熟。

生物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术，其基本原理是样品分子离子化后，根据不同离子之间的荷质比（M/E）的差异来分离并确定分子量。对于经过双向电泳分离的目标蛋白质用胰蛋白酶酶解（水解Lys或Arg的-C端形成的肽键）成肽段，对这些肽段用质谱进行鉴定与分析。

蛋白质组学的研究手段有哪些?原来这里已经有回答了,还不满意,希望详尽...

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对学龄儿童实验证明，每餐面包中加0.5克赖氨酸的实验组的身高和体重均显著超过其他学龄儿童。有的国家还在儿童青少年午餐面包中加25克黄豆粉和适量的钙、铁、维生素，半年后这些儿童青少年比吃普通饮食的儿童青少年重62千克，高0.9厘米，血色素高4克。

EST是从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA 部分序列，代表一个完整基因的一小部分，在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等，平均长度为360 ±120bp。EST 来源于一定环境下一个组织总mRNA 所构建的cDNA 文库，因此EST也能说明该组织中各基因的表达水平。

TMT定量蛋白组学助力PRV-宿主细胞互作的分子机制研究

1、迄今为止，应用蛋白质组学来分析PRV-宿主细胞互作机制的研究还很少。因此本文***用TMT标记定量蛋白质组学方法来比较PRV感染后宿主细胞的蛋白表达差异，为进一步揭示PRV发病机制和潜在的抗病毒靶点提供理论依据。

如何对特异蛋白质抗原的定性和定位

凝胶电泳法。蛋白质在电场的作用下会通过凝胶进行迁移，根据其分子量大小及所带电荷的不同，在凝胶中的迁移速度也会有所不同。通过观察电泳后的条带位置，可以判断蛋白质的分子量大小，进而对蛋白质进行定性分析。这种方法分辨率高，常用于蛋白质的分离和鉴定。 免疫化学法。

抗原的特异性是由分子表面特定的化学基团所决定的，这些化学基团称为抗原决定簇。抗原决定簇是免疫应答和免疫反应具有特异性的物质基础。抗原决定簇可以是由连续序列（蛋白质一级结构）组成或由不连续的蛋白质三维结构组成，决定抗原性的特殊化学基团，又称抗原表位。

这两项技术结合即可 具体原理是：1，western杂交印记是将待测蛋白质作为抗原，侵染免疫细胞后获得抗体 2，将抗体制作为探针，加荧光标记后将抗体注入细胞，进行放射自显影，从而定位该蛋白质。

抗原的基本性质具有异物性、大分子性和特异性。异物性是指进入机体组织内的抗原物质，必须与该机体组织细胞的成分不相同。

决定抗原特异性的物质基础是抗原决定簇。TD-Ag需在T细胞参与下才能***B细胞产生抗体，大多数抗原属此类，可***机体产生IgG、igM、IgD等抗体，也能引起细胞免疫和免疫记忆，不易产生免疫耐受性。

抗体是在对疾病的反应中产生的，能帮助机体抵抗特殊疾病 特异性免疫又称获得性免疫或适应性免疫，这种免疫只针对一种病原。是获得免疫经后天感染（病愈或无症状的感染）或人工预防接种（菌苗、疫苗、类毒素、免疫球蛋白等）而使机体获得抵抗感染能力。

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