蛋白质上的磷酸化位点-蛋白质磷酸化在哪个细胞器

本篇文章给大家分享蛋白质上的磷酸化位点，以及蛋白质磷酸化在哪个细胞器对应的知识点，希望对各位有所帮助。

文章信息一览：

• 1、抑癌基因的P53表达的蛋白质发挥生物学作用的部位是
• 2、简述检测蛋白质磷酸化的检测方法及其原理
• 3、怎么确定(预测)它的磷酸化位点(丝氨酸,酪氨酸
• 4、蛋白位点的修饰会引起分子量偏高吗?

抑癌基因的P53表达的蛋白质发挥生物学作用的部位是

【答案】A 【答案解析】试题分析：P53基因是一种抑癌基因，故A正确。P53基因抑制细胞分裂，在衰老和凋亡过程中应该会表达，故B错误。干细胞的分裂能力比较强，其表达水平较低。神经细胞虽然不能分裂但应含有生物体的全套基因，不D错误。

P53基因人体抑癌基因。该基因编码一种分子量为53kDa的蛋白质，命名为P53。p53基因的失活对肿瘤形成起重要作用。但是事物必然有它的两个方面，p53是一个重要的抗癌基因使癌细胞***，防止癌变；还具有帮助细胞基因修复缺陷的功能。

人体抑癌基因。该基因编码一种分子量为53kDa的蛋白质，命名为P53。p53基因的失活对肿瘤形成起重要作用。P53蛋白主要集中于核仁区，能与DNA特异结合，其活性受磷酸化调控。正常P53的生物功能好似“基因组卫士（guardian of the genome）”，在G1期检查DNA损伤点，监视基因组的完整性。

【答案】：P53蛋白的生物学功能较为复杂． 目前已知的功能有：①转录调节及抑制细胞生长的作用：P53蛋白促进WAFl/CIPl基因表达产生一种分子量为21kD的蛋白质（p21WAF1/CIPl），诱导细胞生长停滞于G1期。②参与程序性细胞凋亡：P53蛋白使损伤细胞停留在G1期，以便使DNA损伤修复后再进入细胞周期。

P53基因编码的野生型P53蛋白拥有多种功能域，如N-末端的转录激活结构域，与TF11D复合物结合，参与基因转录。生长抑制结构域富含脯氨酸，有助于与含SH3结构域的蛋白质交互，连接信息传递途径。

突变的P53蛋白与野生型的P53蛋白相结合，形成的这种寡居蛋白不能结合DNA，使得一些癌变基因转录失控导致肿瘤发生。值得提出的是，所谓“抑癌基因”也是在肿瘤研究过程中命名的。事实上，细胞抑癌基因也是细胞染色DNA的正常组成成分，具有重要的生理功能。除了肿瘤之外，它们在多种疾病中发挥重要作用。

简述检测蛋白质磷酸化的检测方法及其原理

磷酸化蛋白质的鉴定方法可以分为直接检测和间接检测两种。以下是几种常见的方法：免疫印迹（WB）：通过使用特异性抗体来检测靶蛋白质的磷酸化状态。在电泳分离蛋白质后，可以使用抗磷酸化特异性抗体识别磷酸化位点，并通过信号的强度来定量磷酸化水平。

目前研究蛋白质磷酸的方法有放射性同位素标记、生物质谱分析等多种方法。

基本原理就是设计个bait将目的蛋白留在柱子上或沉淀下来。

检测 蛋 白 混合物中磷酸化蛋白的经典方法是先 行电泳分离蛋白质，然后用放射自显影术或针对磷 酸化蛋白的免疫印记方法来检测。近来，Pro-Q Diaround 磷酸化蛋白胶染色是一项重大的技术突 。破b]。

怎么确定(预测)它的磷酸化位点(丝氨酸,酪氨酸

1、下面这个网址可以在线分析蛋白质，包括预测N或者O链接糖基化位点、磷酸化位点、跨膜区等等，你只要输入蛋白质序列即可。希望对你有帮助。

2、磷酸化位点一般有丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸。其中，丝氨酸和苏氨酸是最常见的磷酸化位点，因为其结构末端含有羟基，羟基很活泼，可以与磷酸基团结合。磷酸化的过程就是传递磷酸基团。所以说，蛋白质中如果某个丝氨酸很保守的话，很大程度上就是磷酸化位点。

3、苏氨酸，丝氨酸、酪氨酸。因为他们有羟基基团，可以和磷酸基团脱水生成磷酸酯 。但并不是所有这三类氨基酸都会发生磷酸化。磷酸化需要特定的氨基酸序列motif基序。

4、磷酸化蛋白胶染色 检测 蛋 白 混合物中磷酸化蛋白的经典方法是先 行电泳分离蛋白质，然后用放射自显影术或针对磷 酸化蛋白的免疫印记方法来检测。近来，Pro-Q Diaround 磷酸化蛋白胶染色是一项重大的技术突 。破b]。

5、苏氨酸，丝氨酸、酪氨酸等氨基酸残基能被磷酸化，因为他们有羟基基团，可以和磷酸基团脱水生成磷酸酯。磷酸化（英语：Phosphorylation）或称磷酸化作用，指在蛋白质或其他类型分子上，加入一个磷酸（PO32-）基团，也可定义成“将一个磷酸基团导入一个有机分子”。此作用在生物化学中占有重要地位。

蛋白位点的修饰会引起分子量偏高吗?

1、蛋白质分子量可能会小于预测值，可能以下几个原因：翻译后修饰：蛋白质在翻译过程中可能会经历各种修饰，例如磷酸化、甲基化、糖基化等。这些修饰会改变蛋白质的质量，使其分子量增加。剪切变体：某些蛋白质可能具有多个可产生剪切变体的位点。

2、【答案】：优点：PEG修饰蛋白免疫原性大大降低难以激发抗体产生不会通过免疫反应被清除体内半衰期延长；修饰后蛋白分子量增加使其不被肾脏代谢血液循环时间延长药物半衰期延长。 存在的问题：①PEG修饰后的蛋白活性降低。

3、蛋白质磷酸化后分子量变大。设计实验：空白组（阴性对照），蛋白质A基因敲除，western blot检验蛋白B；实验组，对蛋白质A进行RNA干扰，干扰前后分别进行western，也针对B；阳性对照，AB同时表达，对B做western。同时利用磷酸化抗体定性检测B的磷酸化情况。

4、此外有的目的蛋白会存在糖基化位点或其他修饰位点，条带大小可能会远超理论分子量。因而需求查阅文献或是uniprot来得知蛋白的剪切体大小以及修饰位点等。 背景过高 在局部WB结果中，条带之外本应是空白的背景也会有较深的颜色，对剖析结果会产生干扰，而且结果图不美观，难以用于文章发表。

5、GST-RHA3A，而不是GST-RHA3A（I104A，保守的Ile位点）导致分子量上近似8kDa的差异。在rha3a/b突变体中，***22诱导的BIK1的单泛素化减少。这些结果说明RHA3A/B塑造了***22诱导的BIK1的单泛素化。

6、蛋白质糖基化后一般都是会对其分子量有影响，而具体增加多少并不是固定的。有些蛋白有同源异构体被抗体识别，分子量可以增加很多倍。有一些结构比较单一的蛋白分子量也并没有太多变化。

关于蛋白质上的磷酸化位点和蛋白质磷酸化在哪个细胞器的介绍到此就结束了，感谢你花时间阅读本站内容，更多关于蛋白质磷酸化在哪个细胞器、蛋白质上的磷酸化位点的信息别忘了在本站搜索。