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大肠杆菌基因工程-大肠杆菌基因工程菌的构建

基因工程 11个月前 (05-31) 140

今天给大家分享大肠杆菌基因工程，其中也会对大肠杆菌基因工程菌的构建的内容是什么进行解释。

文章信息一览：

1、大肠杆菌作为基因工程受体菌的特点：发酵产品具有高浓度、高转化率和高产率。菌株能利用常用的碳源，并可进行连续发酵。菌株不是致病株，也不产内毒素。代谢控制容易进行。能进行适当的DNA重组，并且稳定。

2、但是它也存在局限性，比如表达的外源蛋白多为不可溶的（包涵体），在真核生物或病毒蛋白的表达上尤为突出，当然这些也可以通过纯化后的复性等手段使其重新获得活性，但是并不是都能够成功的。因此就有人***用枯草芽孢杆菌、酵母菌甚至是杆状病毒等其他的表达系统以期获得理想的结果。

（图片来源网络，侵删）

3、大肠杆菌常作为基因工程的受体细胞是由于繁殖速度快。解析：大肠杆菌是细菌，属于原核生物，具有繁殖快、操作简便等优点。

为什么选大肠杆菌进行基因工程的实验比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率，并优化了质粒DNA转化感受态细胞体系。结果表明：高效法制备的感受态细胞转化效率极显著高于普通法制备感受态细胞的转化效率，其效率提高了961%，而高效法感受态细胞转化效率与商品化的感受态细胞转化效率差异不显著。

将目的基因导入大肠杆菌和酵母菌是为了让目的基因得以表达，我们知道，基因的作用是传递遗传信息，而遗传信息的表达就是通过转录等生成特定的蛋白质，而蛋白质就是生物表达其生物特性的基础。

（图片来源网络，侵删）

因为大肠杆菌繁殖速度特别快，而且极容易接收外源质粒，便于转化。

遗传背景清楚；目标基因表达水平高；表达系统成熟完善；易于培养（培养方法简单、生长快、培养周期短、抗污染能力强）、成本低；被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物。

优点的话相当多，比如代时短，易培养，研究充分，便于科研者改造，对绝大多数质粒载体适用，相关信息丰富，易表达，好多好多，所以大家都在用。

大肠杆菌常作为基因工程的受体细胞是由于繁殖速度快。解析：大肠杆菌是细菌，属于原核生物，具有繁殖快、操作简便等优点。

大肠杆菌是原核生物，具有唯一的细胞器核糖体。基因工程中大肠杆菌通常作为导入重组基因的受体，因为它具有体型小，易操作，可大量繁殖等优点。

在基因水平上，人和细菌的遗传机制是一致的。细菌和人的遗传物质都是DNA，都使用同一套遗传密码子，都遵循中心法则。因此，通过基因重组，细菌能够合成人体的某些蛋白质。

利用逆推法人工合成胰岛素的基因。将该基因加到运载体上（比如大肠杆菌的质粒上）；将此动载体导入受体细胞（大肠杆菌）中；利用发酵工程大量培养此种大肠杆菌。从发酵液中提取基因工程产物。

答案 B.将控制胰岛素的基因转入大肠杆菌，并大规模培养。因为大肠杆菌生产人的胰岛素，是利用基因工程里的转基因技术，把人的胰岛素基因转入大肠杆菌中，通过转录，翻译，从细胞内分泌出胰岛素。

基因工程将人的胰岛素基因导入大肠杆菌中理论上需要4步胰岛素基因的获取可以从基因文库中获取，利用PCR技术扩增胰岛素基因，也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。

生物制法：首先剪切胰岛素基因，再将胰岛素基因转入人的大肠杆菌内，再创造大肠杆菌裂殖的有利环境，对大肠杆菌进行大规模培养，使之产生大量的治疗糖尿病的药物——胰岛素。

大肠杆菌里面有质粒啊，质粒是细菌细胞内一种自我***的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代。把胰岛素基因连接质粒，就可以在大肠杆菌里扩增然后得到表达。

获取目的基因，即为胰岛素基因胰岛素基因表达载体的构建将胰岛素基因导入大肠杆菌，运用的方法是用钙离子处理细胞，使细胞成为感受态细胞；然后将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。

1、大肠杆菌常作为基因工程的受体细胞是由于繁殖速度快。解析：大肠杆菌是细菌，属于原核生物，具有繁殖快、操作简便等优点。

2、因为大肠杆菌繁殖速度特别快，而且极容易接收外源质粒，便于转化。

3、在基因水平上，人和细菌的遗传机制是一致的。细菌和人的遗传物质都是DNA，都使用同一套遗传密码子，都遵循中心法则。因此，通过基因重组，细菌能够合成人体的某些蛋白质。

4、受体细胞是指在转化和转导（感染）中接受外源基因的宿主细胞。作为基因工程的受体细胞必须具备下面的特点：（1）具有接受外源DNA的能力；（2）一般应为限制酶缺陷型（或限制与修饰系统均缺陷）；（3）一般应为DNA重组缺陷型；（4）不适于在人体内或在非培养条件下生存；（5）它的DNA不易转移。

5、即处于感受态）易于接纳外源DNA，这样才可以做受体细胞。载体的主要用途是将目的基因带入受体细胞且对受体细胞的生存不会产生太大影响。大肠杆菌里本来就有质粒，换句话说，质粒可以从大肠杆菌里提取出来；而用噬菌体的宿主细胞就是大肠杆菌。所以受体细胞是大肠杆菌时通常选用质粒和噬菌体作载体。

6、假设如果基因工程中的大肠杆菌自身含有质粒的话，那我们导入的质粒在纯化的过程中岂不是都将大肠杆菌本身的质粒都纯化出来了么？并且自身的质粒也会对我们导入的质粒产生干扰。不合逻辑。因此进行改造后的大肠杆菌是不含有质粒的，这样我们才可以将我们自己构建好的质粒导入大肠杆菌中。

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