基因敲除基因工程-基因敲除技术应用
今天给大家分享基因敲除基因工程，其中也会对基因敲除技术应用的内容是什么进行解释。
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利用“基因敲除”技术,能“敲除”DNA上的特定基因.该技术的主要过程示意...
1、是指在基因序列里插入两个flox位点，当与cre小鼠杂交后激活flox位点从而敲掉两个flox之间的那一段基因。绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组 （homologous recombination）的机制，其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列，其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。
2、目前，在ES细胞中进行同源重组已经成为一种研究特定基因甚至基因的特定结构域和对小鼠染色体组上任意位点进行遗传修饰的常规技术。
3、敲除基因的方法是设计寡核苷酸序列。具体介绍：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。
4、基因敲除的操作步骤基本是获得干细胞、载体构建、导入基因、性状改变。基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性，是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。
基因工程的概念
【答案】：基因工程又可称为DNA重组、分子克隆、基因操作等，是按照工程设计的方法，根据预先没计的蓝图，***用分子生物学、核酸生物化学以及微生物遗传学的现代方法和手段。实现DNA的人工重组。这种DNA重组主要是指创造自然界中没有的DNA分子的新组合。
基因工程，又称基因拼接技术和DNA重组技术，是指以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
基因工程[1]（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术。所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内***、转录、翻译表达的操作。
验证基因敲除?
1、可以***用PCR技术进行检测。第一，去部分愈伤组织，抽提其DNA。利用原目的基因的引物进行PCR扩增。因为基因删除部分，那么PCR产物会出现变短或者无目的产物。第二，将目的产物进行测序，更加准确得知是否敲除成功。
2、利用基因重组的技术进行基因敲除，根据目的基因序列设计合成出同源基因片段，利用基因打靶技术将携带同源基因片段的基因打靶载体，用电穿孔的技术导入同源的胚胎干细胞中，利用同源基因片段取代靶基因，达到基因敲除的目的。筛选出基因打靶成功的细胞，用选择性培养基筛选出基因打靶成功的细胞。
3、用基因敲除，表达，和过表达来验证。先用基因敲除看看，这种代谢产物是否还能表达。还有就是把预测的这个片段导入不能产生这种功能的宿主中去，看看这个被导入的宿主是否也能表达产生这种代谢产物。
4、基因敲除一般应用于鼠，而最常用的鼠的种系是129及其杂合体，因为这类小鼠具有自发突变形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的倾向，是基因敲除的理想实验动物。而其他遗传背景的胚胎干细胞系逐渐被发展应用，最来自于C57BL/6×CBN/JNCrjF1小鼠的胚胎干细胞系成功地用于基因敲除。
5、应用：基因敲除细胞系建立、基因敲除建立动物疾病模型。技术优势：相较于在mRNA水平“敲低”目的基因的RNAi而言，CRISPR/Cas9系统造成基因序列的缺失，从而能完全沉默（即敲除）目的基因。
6、是指在基因序列里插入两个flox位点，当与cre小鼠杂交后激活flox位点从而敲掉两个flox之间的那一段基因。
基因工程和转基因技术有什么区别和联系?
转基因技术是基因工程的一种手段和方法 转基因技术∈基因工程 狭义的基因工程仅指用体外重组DNA技术去获得新的重组基因；广义的基因工程则指按人们意愿设计，通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。
转基因技术是指利用DNA重组、转化等技术将特定的外源目的基因转移到受体生物中，并使之产生可预期的、定向的遗传改变。
针对不同 转基因技术是指利用DNA重组、转化等技术将特定的外源目的基因转移到受体生物中，并使之产生可预期的、定向的遗传改变。基因编辑是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。
如果我通过用辐射爆破某物来做出 150，000 次完全随机的变化，只是为了看看会发生什么，那不是基因工程。具有讽刺意味的是，在美国法律看来，只有顺基因和转基因工程被认为是转基因生物。所有其他更改都不是。
转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的DNA片段。DNA片段被转入特定生物中，与其本身的基因组进行重组，再从重组体中进行数代的人工选育，从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。
基因工程，包括转基因技术。当然，蛋白质工程等也属于基因工程。转基因，即把优质基因导入受体细胞，使细胞发育成个体表现出优良性状。克隆，即把优质亲本进行近乎100%的***。把供体细胞核取出（实际并不这么操作，这是理论上的），放入去核的卵母细胞，发挥其全能性，发育成个体。
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