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基因工程制备-基因工程制备抗体

基因工程 11个月前 (05-13) 131

文章阐述了关于基因工程制备，以及基因工程制备抗体的信息，欢迎批评指正。

文章信息一览：

带有人的胰岛素基因的基因工程菌放到大型的发酵罐里，给它提供合适的条件和营养物质，进行人工培养，可以大量繁殖，生产出大量的人胰岛素。大肠杆菌就成为生产胰岛素的“活工厂”。

利用逆推法人工合成胰岛素的基因。将该基因加到运载体上（比如大肠杆菌的质粒上）；将此动载体导入受体细胞（大肠杆菌）中；利用发酵工程大量培养此种大肠杆菌。从发酵液中提取基因工程产物。

（图片来源网络，侵删）

扩增出来，克隆到原核表达载体中，比如pET28这种，然后将带有人胰岛素基因开放阅读框的重组载体转化到大肠杆菌中，然后用IPTG诱导，诱导表达之后，裂解菌体后，用锂离子交换柱纯化带有His标签的人胰岛素。然后，检测其生物活性。

生物制法：首先剪切胰岛素基因，再将胰岛素基因转入人的大肠杆菌内，再创造大肠杆菌裂殖的有利环境，对大肠杆菌进行大规模培养，使之产生大量的治疗糖尿病的药物——胰岛素。

要提高胰岛素的产量，就必须提高表达载体的启动子活性，一般***用的强启动子活性，另外对编码人的胰岛素基因进行改造，使得符合大肠杆菌的密码子偏爱性。青霉素工业上***用的产黄青霉工业菌株来生产。

（图片来源网络，侵删）

1、蛋白质分子的产生是由生物体中DNA所决定的，可以通过对DNA分子的修饰改造改变生物的性状，根据DNA半保留***的机理、对DNA分子的修饰改造可以通过DNA的***进行传递，因此，三大理论的发现为基因工程技术的诞生奠定了理论基础。

2、年，美国Lilly公司首先实现利用大肠杆菌生产重组胰岛素，标志着世界第一个基因工程药物的诞生。1992年荷兰培育出植入了人***基因的转基因牛，人***能 *** 红细胞生成，是治疗贫血的良药。

3、基因工程的学科起源：基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于本世纪70年代诞生的一门崭新的生物技术科学。基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术。

4、基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于本世纪70年代诞生的一门崭新的生物技术科学。

1、将人的胰岛素基因送到大肠杆菌细胞中，使得大肠杆菌自身可以合成胰岛素。科学家们把人的胰岛素基因送到大肠杆菌的细胞里，让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合。

2、利用逆推法人工合成胰岛素的基因。将该基因加到运载体上（比如大肠杆菌的质粒上）；将此动载体导入受体细胞（大肠杆菌）中；利用发酵工程大量培养此种大肠杆菌。从发酵液中提取基因工程产物。

3、找到胰岛B细胞，然后自己找现成的mRNA，在反转录出DNA然后用扩增仪扩增，修饰后接合到运载体（质粒，含有标记基因，一般***用抗药性或抗生素基因做标记基因）上，注入微生物（大肠杆菌）当然是大量导入，然后选择培养基筛选。

1、因为大肠杆菌繁殖速度快易培养，可以快速大量合成所需要的胰岛素，便于工业化生产。

2、大肠杆菌拥有游离于拟核之外的可表达环状DNA——质粒。所以引入DNA片段要相对容易一些。而且大肠杆菌比真核细胞繁殖快，易培养，比较适宜工业生产。

3、用大肠杆菌生产转基因的胰岛素时，所使用的胰岛素基因，已经过复杂的修饰过程，去除了内含子等部分，重新更改了启动子和操纵子。

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